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液相色谱仪新技术:微柱液相色谱及输液泵系统
  • 发布日期:2016-01-21     信息来源:      浏览次数:2004
    •  微柱液相色谱仪技术经历了数十年的发展,从早期的使用不锈钢管的微孔填充柱,发展到使用熔融硅胶毛细管的毛细管填充柱。进入20世纪80年代后期,随着生命科学研究、临床医学研究、新型药物研制、生物工程技术的发展、对产品质量控制和环境监测指标的升级,提供了大量组成复杂样品的分析任务。

            为此必须提供具有分离能力和高灵敏度检测能力的全新分析方法,并用于微量和痕量组分的分离和检测。

            纳米(标度)液相色谱技术和超高压液相色谱技术正是适应上述分析要求,先后于20世纪80年代末期和90年代初期先后提出。他们突破了常规液相色谱仪理论的约束,采用粒径约为1.0μm的粒子填充色谱柱。在实验装置上采用当代的技术,用微流路处理器提供纳升数量级微小、稳定的流动相流量,用微芯片制作技术在硅晶片上蚀刻出纳米尺寸的色谱柱管,制造了填充压力高达410MPa(60000psi)的高压输液泵和耐压1030MPa(150000psi)的高压进样阀,实现了前人从未实践过的毛细管液相色谱分离技术。创建了理论塔板数高至20~40万块/m的高柱效,完成了组成复杂生物样品的分离,还实现了与MS的联用。从这些新技术的进展,可充分看到色谱工编辑的创造能力。

            用于微柱液相色谱仪分析的高压输液泵,其输出流量应当准确,并有良好的重复性。由于输出流量较小,早期曾使用气动放大泵和螺杆注射泵,后经改造常规往复式柱塞泵,使其也可输出低流量流动相。

            现多采用小型螺杆注射泵和往复式柱塞泵。往复式柱塞泵由于螺杆注射泵,它具有对大的柱反压的补偿能力,快的流路平衡和稳定性,并可用于梯度洗脱。由于液流的混合有一定的困难,在低流速下柱加压是一个耗费时间的过程,若在梯度洗脱中使用螺杆注射泵,会明显的增加梯度延迟。
       

            当对微柱进行二元、三元、四元梯度洗脱时,使用低压梯度仍是的方法,此时应使用精密时间比例电磁阀。此阀能准确控制每种溶剂的比例,确保不存在渗漏和粘结,使每种低流量溶剂在小体积混合器中彻底混合。当使用高压梯度洗脱时也必须使用小体积的混合器,为保证高的混合效率,混合器也可使用一个很小的填充柱。对内径1.0mm、长200~300mm的微柱,其柱体积约为100~150μL;对内径0.5mm、长250mm的微柱,其柱体积已小至30μL。大家由此可知,微柱液相色谱仪梯度洗脱中所用混合器的体积要远小于柱体积,并要具有很高的混合效率,这在仪器制作商的难度很大。当然,由于液相色谱仪厂家的技术和各方面服务是不尽相同的,要想仪器、使用寿命达到zui长,那么选择一家比较专业的厂家是异常重要的。

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