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金沙国际集团  ◇  技术支撑  ◇  液相色谱柱正确使用方法
液相色谱柱正确使用方法
  • 发布日期:2016-07-11     信息来源:      浏览次数:1670
    • 一、样品方面
      1.除去微粒及杂质
      2.了解样品在流动相中的溶解度
      如溶样品的溶剂不是流动相,一定要用流动相试溶解度,防止其在流动相中析出
      3.了解样品与色谱柱的基质/填料是否有相互作用
      二、流动相方面
      1.除去微粒
      纯度的要求:超纯水,梯度实验时水中有机杂质含量要低;缓冲液的PH值,在填料的允许范围内;缓冲液(盐)的浓度;有机溶剂:色谱纯,杂质含量尽量低,并与填料相匹配
      2.流动相对样品的溶解度
      有机溶剂或水的比例
      三、色谱柱的清洗
      对所做的样品要有充分的了解,用对该样品洗脱能力zui强的流动相清洗
      硅胶柱的一般方法是先用甲醇洗去极性杂质,然后用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化
      键合相柱(烷基)的一般方法是用20倍体积的甲醇-氯仿-甲醇-水依次冲洗
      (记住:每种色谱柱可能性有特定的方法,一定要先看其使用说明!)
      四、色谱柱的存放
      存放前的处理要除去杂质、缓冲盐
      合适的存放溶剂
      避免色谱柱床的干涸
      避免机械震动
      防止细菌生长
      注意存放的温度
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